该片讲述了普通高中生迈尔斯·莫拉斯如何师从蜘蛛侠彼得·帕克，成长为新一代超级英雄的故事。影片中迈尔斯和从其它平行宇宙中穿越而来的彼得、女蜘蛛侠格温、暗影蜘蛛侠、潘妮·帕克和蜘猪侠集结成团，六位蜘蛛侠首次同框大银幕，对抗蜘蛛侠宇宙最强反派。